材料與方法
超凈工作臺(tái)( 蘇州安泰) 。高壓滅菌器( 日本三 洋) 。電子天平( 日本島津) 。超純水機(jī)( 美國(guó)密理 博) 。pH 計(jì)( 上海雷磁) 。隔水式電熱恒溫培養(yǎng)箱 ( 上海齊欣) 。基礎(chǔ)培養(yǎng)基: 200 g 馬鈴薯去皮切塊,煮沸 后 8 層紗布過濾,濾液加 18 g 瓊脂融化定容至 1000 mL,30 min,121℃滅菌。篩選氮源培養(yǎng)基: 向基礎(chǔ)培養(yǎng)基中分別加 入蛋白胨和酵母膏 2 種有機(jī)氮及 NH4Cl、NaNO3 和 KNO3 3 種無機(jī)氮作氮源,制成篩選氮源培養(yǎng)基,30 min,121℃滅菌。滅菌后的基礎(chǔ)培養(yǎng)基于無菌環(huán)境下倒入 9 cm 滅菌培養(yǎng)皿中,每個(gè)培養(yǎng)皿中裝 16 mL 培養(yǎng)基,冷卻 后制成培養(yǎng)平板。將活化的思?jí)殉喙侥阜N菌絲切成 大小 9 mm3 的菌塊,無菌條件下接種于培養(yǎng)平板中 央。分別設(shè) pH 4、5、6、7、8、9、10 等7 個(gè) pH 梯度,每 個(gè)梯度設(shè) 5 個(gè)重復(fù),23℃ 暗光培養(yǎng)。待接種塊菌絲 萌發(fā)生長(zhǎng)時(shí)測(cè)量菌絲體長(zhǎng)度,直至菌絲體長(zhǎng)滿培養(yǎng) 皿表面,記錄菌絲長(zhǎng)度,計(jì)算生長(zhǎng)速度。
結(jié)果及分析
思?jí)殉喙綄?duì)單糖的利用能力較好,在果糖培養(yǎng) 基上生長(zhǎng)速度為 3. 7 ± 0. 12 mm /d,葡萄糖培養(yǎng)基上 生長(zhǎng)速度為 3. 82 ± 0. 14 mm /d,所以葡萄糖可作為 最佳碳源。而對(duì)雙糖和多糖的利用能力較差,在以 麥芽糖和可溶性淀粉為碳源的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)較為緩 慢,在蔗糖碳源的培養(yǎng)基上菌絲長(zhǎng)勢(shì)極弱,生長(zhǎng)速度 僅為 0. 35 ± 0. 10 mm /d.培養(yǎng)基中無葡萄糖碳源,菌絲可以保持較 低的基礎(chǔ)生長(zhǎng),約為 2. 75 ± 0. 15 mm /d。隨葡萄糖 濃度升高,菌絲生長(zhǎng)速度呈先升高后降低的趨勢(shì)。 在 2% 時(shí)達(dá)到頂峰,約為 3. 82 ± 0. 14 mm /d,而到 4% 時(shí)卻降低到 3. 01 ± 0. 18 mm /d,所以 2% 是培養(yǎng) 基中葡萄糖的最佳添加濃度。